紫外可見分光光度計多組分析方法及使用方法

       紫外可見分光光度計-多組分分析法在一個波長，一個溶液的總吸光度是等于各個成分的吸光度的總和。根據這點就可分析混合物的各個組分。如果有一種混合物，雖然是多組分，但組分吸收帶不相重迭。在某波長一種組分的吸收很大，而其它組分在此波長則無吸收。這樣就可在此波長采用上述的標準曲線法進行此組分的定量測定。

      如果一個多組分混合物，其吸收帶雖然相互重迭，但能遵守比耳定律，則可以采用解聯立議程式的辦法來進行定量。如混合物中含有n個已知組分，則需在n個適當的波長進行n次組分各自在n個波長的摩爾吸光系數。波長的選擇應注意使一個組分的吸光系數比其它組分的吸光系數大，這樣才能得到較高的度。如果混合物中的幾個組分吸收帶相互重迭的并且不遵守比耳定律，便不能用解聯立方程式的辦法來解析。此時用分光光度法定量比較困難。Fry采用校正法把混合樣品中的五個組分配成不同的溶液，得到一系列校正曲線。在校正曲線的基礎上，解析得到了五組分的含量。但方法十分繁瑣，使用不便。如果混合物中含有未知吸收帶的組分就更困難了。


      此時先用化學法分離純化。但也可直接利用分光光度法來分析。Morton利用有雜質存在吸收光譜形狀的改變計算混合物中含有雜質時魚肝油的量。雖然利用分光光度法可以作多組分分析，但方法比較繁瑣。近年來，很多分光光度計設有多組分分析附件。借助于微處理機來分析計算混合物中多種組分的含量，十分簡便、迅速、準確。使得分光光度法在混合的定量分析中發揮更大的作用。同樣，也可用后面介紹的導數光譜法來定量。

      使用注意事項

（一）使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。
（二）取吸收池時，手指應拿毛玻璃面的兩側，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
（三）測定時除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm石英吸收池，在規定的吸收峰±2nm以內，測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長作為測定波長，除另有規定外吸收度zui大波長應在該品種項下規定的測定波長±2nm以內。
（四）供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
（五）供試品應取2份，如為對照品比較法，對照品一般也應取2份。平行操作，每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以內。
（六）選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低，狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。